野生型和突变型PS1-EGFP真核共表达载体的构建与鉴定

来源 :神经解剖学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chi421
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为了构建人野生型和突变型PS1(早老素-1,presenilin-1)-EGPF共表达蛋白的真核表达重组质粒pcDNA3.1/PS1-EGFP,本研究应用下述方法:对野生型pcDNA3.1/PS1(WT)质粒,采用一步法定点突变技术构建pcDNA3.1/PS1(C407G)突变质粒;合成两对引物,利用PCR技术从pEGFP-C1质粒合成EGFP cDNA片断,在EGFP转录起始密码子ATG之前导入一BamHⅠ酶切位点,利用与pcDNA3.1/PS1质粒共存的另一EcoRⅠ酶切位点,将合成的EGFP片断通过
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