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建立了一种用非特异性酶链酶蛋白酶E（Pronase E）从糖蛋白上释放N-糖链的方法.以牛胰核糖核酸酶B（Ribo B）和鸡白蛋白（Chicken Albumin）为材料,用Pronase E代替N-糖苷酶F（PNGase F）释放N-糖链.当蛋白酶质量与糖蛋白质量比为1∶1时,得到只带一个天冬氨酸（Asn）的闭环N-糖链,称其为糖氨酸（gly-can-Asn）,这样既为糖链引入了天然的-NH2活性基团,同时还保持了糖链原有的还原端闭环结构.以9-氯甲酸芴甲酯（Fmoc-Cl）为衍生试剂对解离后的糖氨酸进