蛋白质工程改造磷脂酶D提高磷脂酰丝氨酸产量

来源 :食品工业科技 | 被引量 : 0次 | 上传用户：sxx1203

【摘要】

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为了进一步提高磷脂酰丝氨酸(PS)产量,将来源于Streptomyces katrae的野生型磷脂酶D(SkPLD)于E.coli BL21(DE3)中进行异源表达,获得菌株E.coli BL21(DE3)/pET28a-SkPLD,以磷

【作者】

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冯小娜齐娜宋伟刘佳刘立明吴静

【机构】

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江南大学药学院,江南大学食品科学与技术国家重点实验室

【出处】

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食品工业科技

【发表日期】

：

2020年17期

【关键词】

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蛋白质工程磷脂酶D 磷脂酰丝氨酸催化通道催化距离定点突变 protein engineeringphospholipase Dphosphatidyls

【基金项目】

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国家轻工技术与工程一流学科自主课题(LITE2018-20),江苏省科技支撑计划社会发展项目(BE2018623)

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为了进一步提高磷脂酰丝氨酸(PS)产量,将来源于Streptomyces katrae的野生型磷脂酶D(SkPLD)于E.coli BL21(DE3)中进行异源表达,获得菌株E.coli BL21(DE3)/pET28a-SkPLD,以磷脂酰胆碱(PC)和L-serine为底物,发现限制PS产量进一步提高的限制因素是转磷脂酰反应转化率低(<35%)而水解反应转化率过高(>30%)。在对SKPLD结构进行详尽分析的基础上,通过蛋白质工程改造策略扩大底物催化通道,降低位阻效应;同时提高His462

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