转β-甘露聚糖酶基因manA小鼠的制备

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为了获得β-甘露聚糖酶基因manA的转基因小鼠,从黑曲霉中克隆得到β-甘露聚糖酶基因manA,进行体外表达检测甘露聚糖酶活性后,将此基N插入到含有猪腮腺分泌蛋白(PSP)基因启动子的表达载体pPSPBGPneo中,得到在腮腺组织特异表达β-甘露聚糖酶基因mariA的载体pPSP-manA,总长为16.3kb,将其进行线性化后回收得到高质量DNA片段,通过显微注射得到17只原代小鼠,进行PCR和Southemblot检测发现有6只阳性转基因小鼠,表明转β-甘露聚糖酶基因mariA小鼠制备成功。
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