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目的 构建携带人基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)和胶质细胞源神经营养因子(GDNF)基因的真核表达质粒pBudCE4.1-SDF-1α-GDNF,转染恒河猴骨髓基质细胞(BMSCs),观察外源性SDF-1α和GDNF基因在BMSCs中的表达情况. 方法 应用基因重组技术,从cDNA文库获得GDNF和SDF-1α基因,重组到pBudCE4.1双表达载体上.pBudCE4.1-SDF-1α-GDNF经脂质体转染培养的恒河猴BMSCs,48 h后行GDNF和SDF-1α Western blot和免疫组化检测. 结果 酶切、PCR和DNA序列鉴定均证实插入基因片段的正确性;48 h后行West blot和免疫组化证实GDNF和SDF-1α在细胞内能有效表达.pBudCE4.1-GDNF-SDF-1α转染BMSCs表达的GDNF和SDF-1α蛋白的量是阴性对照细胞的10倍和6倍. 结论 双基因真核表达质粒DBudCE4.1-SDF -1α-GDNF转染至恒河猴BMSCs后,SDF-1α和GDNF基因在BMSCs内能有效表达,为BMSCs携带SDF-1α和GDNF双基因自体移植治疗相关疾病奠定了基础。