EGFP转基因大鼠的建立

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目的 建立增强绿色荧光蛋白、(EGFP)转基因大鼠,为器官移植、基因治疗提供理想的动物模型.方法 构建带有CMV-EGFP的重组慢病毒;通过大鼠受精卵透明带下显微注射的方法感染受精卵,并将注射后的受精卵移植到假孕母鼠输卵管中,出生的仔鼠通过PCR方法鉴定,获得首建大鼠;并通过Real Time PCR、Western-blot和荧光观察进行表达分析.结果 显微注射后,210枚成活的受精卵移植到假孕母鼠;经繁育,出生2只大鼠;经PCR鉴定,有1只为阳性,阳性率为50%;经RNA、蛋白水平表达的检测及荧光观察,该大鼠表皮、骨骼肌、胰腺、肾脏、心脏、睾丸等均有EGFP表达.结论 初步建立了转基因大鼠技术,成功获得了可稳定表达EGFP的转基因荧光大鼠.
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