携带人6Ckine/IFNγ,融合基因腺病毒载体的构建和鉴定

来源 :中国生物制品学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liyanfeiwoshi
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目的构建携带人次级淋巴组织趋化因子(6Ckine)和γ-干扰素(IFNγ-)融合基因的重组腺病毒载体Ad-6Ckine/IFNγ,并在真核细胞中表达。方法RT-PCR法分别从人淋巴结和外周血单个核细胞中扩增人6Ckine cDNA和IFNγ cDNA,分两步先后将6Ckine cDNA和IFNγ cDNA连接到腺病毒穿梭质粒的多克隆位点上,二者之间以XbaⅠ酶切位点相连,应用AdMax腺病毒包装系统在HEK293细胞内同源重组,构建重组腺病毒载体Ad-6Ckine/IFNγ,经扩增和纯化后感染真核细胞He
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