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目的
探讨高磷和低钙对正常大鼠甲状旁腺组织分泌功能和细胞增生的影响。
方法立体显微镜下切取正常大鼠两侧甲状旁腺，体外孵育5 d，分别于孵育后第2、3天用高磷或低钙干预。采用流式细胞术检测不同时间点各组细胞凋亡情况；ELISA法检测不同时间点各组细胞上清液全段甲状旁腺激素（iPTH）水平；荧光定量PCR法检测高磷或低钙干预24 h后组织中前甲状旁腺激素原（preproPTH）及增殖细胞核抗原（PCNA）mRNA的表达；Western印迹法检测高磷或低钙干预24 h后组织中PCNA蛋白的表达。
结果流式细胞术结果显示，大鼠甲状旁腺组织体外孵育后第1天和第2天的正常活细胞比例显著高于孵育后第3天至第5天（均P<0.05），孵育后第3天至第5天间活细胞比例的差异无统计学意义。正常磷或高磷培养基干预条件下，孵育后第1天至第5天间细胞存活率（均>85%）的差异无统计学意义。常规培养基孵育条件下，孵育后第1天至第5天间甲状旁腺组织分泌iPTH水平的差异无统计学意义。与正常对照组比较，高磷干预组培养液上清中iPTH水平升高（P<0.05），且高磷干预24 h后甲状旁腺组织preproPTH及PCNA mRNA和蛋白的表达显著上调（均P<0.05）。与正常对照组相比，低钙干预组培养液上清中iPTH水平升高（P<0.05），且低钙干预24 h后甲状旁腺组织preproPTH mRNA的表达显著上调（P<0.05）。
结论体外孵育大鼠甲状旁腺组织是可行的，最佳孵育时间在2 d内。低钙、高磷刺激可增加PTH的合成与分泌，高磷还可促进细胞增生，是生理状态下调节甲状旁腺功能的重要因素。