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高效,快速地将外源DNA导入根癌土壤杆菌

来源 :生物工程学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：maohhmaohh

【摘 要】

：

室温下用５０ｍｍｏｌ／Ｌ ＣａＣｌ２处理根癌土壤杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ）以制备感受态细胞，然后经０℃冰浴及２８℃热击处理，成功地将Ｔｉ质粒中间载体（〉１０ｋｂ）导入了根癌土壤农杆菌中，转化效率每个活细胞可达１０＾－４￣１０＾－５转化子或１０＾６转化子／ｕｇＤＮＡ。探讨了该菌

【作 者】

：

崔武 刘炜 

【机 构】

：

北京大学生命科学学院,北京大学生命科学学院北京100871,北京100871,北京100871

【出 处】

：

生物工程学报

【发表日期】

：

1995年4期

【关键词】

：

植物基因 转化 TI质粒 根癌土壤杆菌 生物工程 Transformation  Ti plasmid  CaCl2  Agrobacterium tumefa 

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室温下用５０ｍｍｏｌ／Ｌ ＣａＣｌ２处理根癌土壤杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ）以制备感受态细胞，然后经０℃冰浴及２８℃热击处理，成功地将Ｔｉ质粒中间载体（〉１０ｋｂ）导入了根癌土壤农杆菌中，转化效率每个活细胞可达１０＾－４￣１０＾－５转化子或１０＾６转化子／ｕｇＤＮＡ。探讨了该菌细胞生长状态、ＣａＣｌ２溶液浓度、温度、液氮、热击、复苏时间以及感受态细胞于４℃或－２０℃（

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