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目的
研究质膜钙ATP酶异构体2(plasma membrane Ca2+-ATPase isoform 2,PMCA2)在C57BL/6J小鼠耳蜗组织中的分布及年龄相关性表达,探讨其与年龄相关性听力损失的关系。
方法运用免疫荧光组织化学的方法检测PMCA2蛋白在不同鼠龄(4、14、22、45周)C57BL/6J小鼠耳蜗中的分布和表达变化;采用实时定量多聚酶链反应(Real-time PCR)检测PMCA2 mRNA在不同鼠龄(4、14、22、45周)小鼠耳蜗中的表达。采用SPSS17.0软件进行统计学分析。
结果免疫荧光的结果显示不同鼠龄C57BL/6J小鼠的耳蜗内外毛细胞、血管纹和螺旋神经节细胞均可见PMCA2蛋白表达,螺旋韧带亦可见有少量PMCA2蛋白表达。随着鼠龄的增长,耳蜗毛细胞出现缺失,螺旋神经节细胞数目逐渐减少,PMCA2蛋白的表达也随着鼠龄的增加而逐渐减少。Real-time PCR结果揭示:随着鼠龄的增长,PMCA2 mRNA表达水平逐渐下降,14周龄的表达水平与4周龄相比,差异有统计学意义(P<0.05);22周龄表达水平与14周龄相比,差异有统计学意义(P<0.05);45周龄表达水平与14周龄相比,差异有统计学意义(P<0.01)。
结论PMCA2蛋白主要分布于C57BL/6J小鼠耳蜗内外毛细胞、血管纹和螺旋神经节细胞,随着鼠龄的增长,PMCA2蛋白和mRNA的表达量逐渐减少。PMCA2的表达下降或功能缺失可能与C57BL/6J小鼠内耳形态的年龄相关性改变以及听力损失有一定关系。