五价钒致神经细胞凋亡中细胞色素C和caspase-9,3蛋白的变化

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目的 研究五价钒致神经细胞凋亡中细胞色素C(Cyt-c)、caspase-9及caspase-3蛋白的变化,为进一步研究五价钒致神经细胞凋亡的作用机制提供资料.方法 用5、10、20 mmol/L的五氧化二钒(V2O5)体外培养大鼠神经元细胞染毒,用原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡的程度;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Cyt-c、Caspase-9、Caspase-3蛋白表达.结果 TUNEL检测结果显示,在细胞核中可以见到凋亡小体,随着染毒剂量增高凋亡小体的细胞数逐渐增多.与对照组比较,0、20 mmol/L染毒组凋亡指数明显增高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).Western blot法检测结果显示,与对照组比较,5 mmol/L染毒组的Cyt-c、caspase-3蛋白表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05); 10、20 mmol/L染毒组的Cyt-c、caspase-9、caspase-3蛋白表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.01).神经细胞凋亡指数AI与Cyt-c、caspase-9、caspase-3呈正相关(r=0.954,P<0.01;r=0.938,P<0.0;r=0.943,P<0.01).结论 五价钒能诱导神经细胞凋亡,Cyt-c、caspase-9及caspase-3蛋白表达在五价钒致神经细胞凋亡的过程中发挥了重要的调控作用。

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