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通过组织块法分离并原代培养人肛瘘管壁组织，用胰蛋白酶和乙二胺四乙酸（EDTA）消化成纤维细胞、上皮细胞，获得更加纯化的成纤维细胞；以DMEM培养液为基础培养蒸，添加胎牛血清（体积分数10％）、青霉素（100U／L）和硫酸链霉素（100U／L），置37℃、5％CO2培养箱中培养。倒置相差显微镜和细胞爬片HE染色。观察成纤维细胞形态结构，并对培养成纤维细胞行角蛋白、波形蛋白免疫细胞化学鉴定．结果分离后的成纤维细胞在第4～12h于体外快速贴壁，第2～4天进入对数期生长、增殖期。细胞起源鉴定波形蛋白免疫细胞化学染