【摘 要】
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目的建立一种简单实用的、探索肿瘤差异表达基因的方法.方法从骨髓瘤细胞株U266中分离出CD45+和CD45－细胞,结合应用减法杂交、抑制性PCR、T/A克隆、测序等技术,寻找CD45+和CD4
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目的建立一种简单实用的、探索肿瘤差异表达基因的方法.方法从骨髓瘤细胞株U266中分离出CD45+和CD45－细胞,结合应用减法杂交、抑制性PCR、T/A克隆、测序等技术,寻找CD45+和CD45－细胞间的差异表达基因.结果减法杂交可缩减约20倍的高丰度表达基因,意即低丰度表达基因富聚约20倍. 用正向或负向减法探针,分别和来源于CD45+ 细胞克隆的质粒DNA杂交,筛选500个表达克隆,发现了几个差异表达基因,并经RT-PCR证实.结论采用常规分子生物学方法建立起来的综合技术,可以用来研究肿瘤性疾病的差异
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