【摘 要】
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为建立检测副流感病毒5型(PIV5)的荧光定量RT-PCR方法,针对PIV5 L基因设计筛选出一对特异性引物和探针,对退火温度、引物浓度、探针浓度进行了优化,并进行了敏感性、特异性和重复性试验。结果显示:最适退火温度为54.7℃,最适引物浓度为0.5μmol/L,最适探针浓度为0.1μmol/L。检测灵敏度为10 copies、0.8 TCID50,特异性结果显示与BPIV3等22种常见病毒及原辅材料均无交叉,重复性试验显示不同模板浓度重复检测变异系数均小于1.5%,重复性良好。
【基金项目】
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中国兽医药品监察所所级课题(201801)。
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为建立检测副流感病毒5型(PIV5)的荧光定量RT-PCR方法,针对PIV5 L基因设计筛选出一对特异性引物和探针,对退火温度、引物浓度、探针浓度进行了优化,并进行了敏感性、特异性和重复性试验。结果显示:最适退火温度为54.7℃,最适引物浓度为0.5μmol/L,最适探针浓度为0.1μmol/L。检测灵敏度为10 copies、0.8 TCID50,特异性结果显示与BPIV3等22种常见病毒及原辅材料均无交叉,重复性试验显示不同模板浓度重复检测变异系数均小于1.5%,重复性良好。
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