【摘 要】
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目的:研究冷冻复苏前后,精子线粒体结构和功能的变化.方法:以健康捐精志愿者为研究对象,采用慢速冷冻复苏方式冷冻复苏精子,比较冷冻复苏前后精子线粒体相关指标变化.采用投
【机 构】
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国家卫生健康委科学技术研究所/国家卫生和健康委员会男性生殖健康重点实验室,北京100081;新余市人民医院泌尿外科,江西新余338000;青岛大学附属医院生殖医学科,山东青岛266000
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目的:研究冷冻复苏前后,精子线粒体结构和功能的变化.方法:以健康捐精志愿者为研究对象,采用慢速冷冻复苏方式冷冻复苏精子,比较冷冻复苏前后精子线粒体相关指标变化.采用投射电镜观察精子线粒体超微结构变化,免疫荧光标记和ELISA法,分别检测精子线粒体膜电位和ATP含量,检测冷冻复苏前后精子氧化应激相关指标.结果:电镜结果显示冻存复苏后精子线粒体结构疏松、线粒体嵴增宽,且部分呈空泡样改变.冷冻复苏后精子活性氧[(11.6±3.8)％]和丙二醛[(3.2±1.4)nmol/108个精子]显著高于冷冻复苏前的(9.6±4.1)％和(2.3±1.2)nmol/108个精子(P＜0.05),总抗氧化能力和超氧化物歧化酶活性显著低于冷冻复苏前[(0.6±0.4)nmol/108个精子vs(0.9±0.4)nmol/108个精子,P＜0.05;(0.9±0.4)nmol/108个精子vs(9.1±3.9)nmol/108个精子,P＜0.05].与冷冻复苏前精子相比,冷冻复苏后精子线粒体膜电位降低显著降低[(52.2±6.2)％vs(55.7±4.9)％,P=0.026],ATP生成显著减少[(56.5±9.0)pmol/106个精子vs(61.3±10.4)pmol/106个精子,P=0.014].结论:冷冻复苏过程会导致精子线粒体超微结构紊乱,膜电位下降,ATP生成减少.
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