【摘 要】
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目的 探究茯苓酸(PA)对膀胱癌细胞BIU87的抑制作用及其机制.方法 体外培养BIU87细胞后加入不同浓度的茯苓酸,CCK-8法检测其对BIU87细胞的生存抑制作用.采用Hoechst染色法观察
【机 构】
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武汉 武汉大学人民医院,湖北,430060430060湖北,武汉 武汉大学人民医院;435000湖北,黄石 湖北理工学院附属黄石市中心医院;
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目的 探究茯苓酸(PA)对膀胱癌细胞BIU87的抑制作用及其机制.方法 体外培养BIU87细胞后加入不同浓度的茯苓酸,CCK-8法检测其对BIU87细胞的生存抑制作用.采用Hoechst染色法观察不同浓度下茯苓酸诱导细胞凋亡的作用.为进一步探究机制,将BIU87细胞采用20μg/mL、40μg/mL、80 μg,/mL的茯苓酸处理后,检测Caspase3的活性及采用westem blot检测凋亡特异性蛋白Caspase9、Cleaved-caspase9、Bcl-2、Bax、Bak的表达.结果 茯苓酸对BIU87细胞有明显的抑制作用,且呈现剂量依赖的趋势.20μg/mL、40μg/mL、80μg/mL的PA作用BIU87细胞后可产生明显的细胞凋亡作用,Hoechst染色可见明显的核碎裂和凋亡小体.计数阳性细胞数目分别为20μg/mL(6.7±1.5)、40μg/mL (13.3±3.5)、80μg/mL(20.7±1.5).BIU87细胞经茯苓酸处理后,Caspase3活化水平明显升高,以对照组为标准,20μg/mL组为(167.3±18.7)％、40μg/mL为(215.0±26.9)％、80μg/mL为(289.7±17.1)％.且Cleaved-caspase9、Bax、Bak蛋白表达水平逐渐升高,Caspase9、Bcl-2蛋白表达逐渐降低,均呈浓度依赖的趋势.结论 茯苓酸可通过诱导细胞凋亡对膀胱癌细胞BIU87产生抑制作用,且可能是通过内源性线粒体凋亡途径介导实现的.
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