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目的采用常规PCR、巢式PCR(Nest PCR,nPCR)和定量PCR(Quantitative PCR,qPCR)检测耶氏肺孢子菌(Pneumocystis jirovecii,Pj)特异性核酸片段,调查脑瘤手术患者咽喉部吸取液中的Pj。方法选取无肺炎脑瘤手术患者108例,留取手术咽喉部吸取液,分别以线粒体大亚基rRNA(Mitochondrial large subunit rRNA,mtLSUrRNA)为靶基因的常规PCR(Mt-PCR)和巢氏PCR(Mt-nPCR),以及主要表面糖蛋白(Major surface glycoprotein,Msg)为靶基因的常规PCR(Msg-PCR),检查咽喉部吸取液中Pj特异性核酸片段,阳性标本进行qPCR,检测分别以mtLSUrRNA和Msg为靶基因的拷贝数。结果 108例脑瘤手术患者咽部吸取液Mt-nPCR、Msg-PCR及Mt-PCR扩增阳性率率分别为41.7%(45/108)、15.7%(17/108)和4.6%(5/108),其中3种检测方法同为阳性1例(占0.9%),任意2种方法阳性11例(占10.2%),Mt-nPCR和Msg-PCR任意1种方法阳性42例(占38.9%),3种方法均阴性54例(占50.0%)。54例PCR检测阳性的标本同时进行mtLSUrRNA定量PCR(Mt-qPCR)和Msg定量PCR(Msg-qPCR)检测,其中MtqPCR检测为100~999拷贝/μl 2例(占3.7%),1 000~9 999拷贝/μl有49例(占90.7%),≥104拷贝/μl有3例(占5.6%);Msg-qPCR检测为1 000~9 999拷贝/μl 14例(占25.9%),10 000~99 999拷贝/μl 21例(占38.9%),100 000~999 999拷贝/μl 14例(占25.9%),≥106拷贝/μl有5例(占9.3%)。54例中Msg-qPCR拷贝数>Mt-qPCR拷贝数51例(占94.4%),Msg-qPCR拷贝数
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