微小RNA-451对人脑U87胶质瘤细胞株增殖和侵袭影响机制的研究

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目的

探讨微小RNA-451(miRNA-451)通过靶标钙结合蛋白39(CAB39)调控缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达对人U87胶质瘤细胞株增殖和侵袭的影响。

方法

培养人脑U87胶质瘤细胞,将其分为空白对照组、无义序列组及miRNA-451 mimics处理组(简称miRNA-451组);将合成的寡核苷酸miRNA-451拟似物(miRNA-451 mimics)转染至U87胶质瘤细胞。实时定量PCR法检测转染后胶质瘤细胞miRNA-451的表达,Western blot法检测CAB39、肝激酶B1(LKB1)、HIF-1α蛋白的表达,应用流式细胞术检测细胞周期的变化,噻唑兰比色分析法(MTT)检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力的变化。

结果

空白对照组、无义序列组、miRNA-451组的miRNA-451相对表达量分别为13.08±0.48、12.91±0.66、9.94±0.29, CAB39的相对表达量分别为2.85±0.05、2.40±0.04、0.41±0.02,LKB1的相对表达量为1.05±0.04、0.95±0.04、0.28±0.02,HIF-1α的相对表达量为0.60±0.02、0.54±0.03、0.14±0.05,差异均有统计学意义(P<0.05);细胞周期分析表明,空白对照组、无义序列组及miRNA-451组细胞G0/G1期DNA含量分别为60.48%、58.70%、75.58%,差异有统计学意义(P<0.05);MTT法分析显示,miRNA-451组细胞生长明显受到抑制,第6天细胞增殖率仅为41.48%;Transwell法分析显示,miRNA-451组穿过Transwell小室的细胞数明显减少,仅为24个,低于空白对照组和无义序列组的51个和45个,差异均有统计学意义(P < 0.05)。

结论

miRNA-451通过降低靶标CAB39的表达调控HIF-1α的表达,抑制人脑胶质瘤细胞的增殖和侵袭能力。

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