【摘 要】
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目的 观察超声微泡携单纯疱疹病毒Ⅰ型胸苷激酶(HSV1-TK)基因在小鼠肝癌细胞H22移植瘤组织中的转染效果及联合更昔洛韦(GCV)后对肿瘤的抑瘤效应.方法 建立小鼠肝癌(H22)皮下
【机 构】
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重庆医科大学附属第二医院肝胆外科,400010
【基金项目】
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重庆市自然科学基金;重庆市卫生局科研项目;国家自然科学基金
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目的 观察超声微泡携单纯疱疹病毒Ⅰ型胸苷激酶(HSV1-TK)基因在小鼠肝癌细胞H22移植瘤组织中的转染效果及联合更昔洛韦(GCV)后对肿瘤的抑瘤效应.方法 建立小鼠肝癌(H22)皮下移植瘤模型40只,随机分成4组,分别经鼠尾静脉注射入等量磷酸盐缓冲液(A组),HSV1-TK(B组)、HSV1-TK(C组)、HSV1-TK+微泡(D组),每次注射200μl,每隔3 d注射1次,共注射3次;对C组、D组小鼠分别给予1 MHz、2 W/cm~2、5 min超声辐照.首次注射HSV1TK 48 h后采用Western blot检测肿瘤组织中TK蛋白的表达情况,且各治疗组分别从腹腔注射GCV 0.2 ml(100 mg·kg~(-1)·d~(-1)),连续注射14 d.测肿瘤大小,计算抑瘤率,治疗结束后处死动物行病理学检查.数据采用重复测量资料的方差分析,两两比较采用LSD-t法.结果 在超声引导下微泡包裹的HSV1-TK基因可以准确定位于肿瘤组织并靶向释放,在处理组中均有TK蛋白的表达,其中D组表达量明显高于其他各组(P＜0.05).抑瘤率在A组、B组、C组、D组中分别为0、3.90%±1.80%、22.70%±2.86%、41.25%±3.20%(C组、D组与B组相比,P值均＜0.05;D组与C组相比,P＜0.05).HE染色结果显示D组较A组的坏死病变程度明显减轻.结论 超声辐照可破坏包裹HSV1-TK基冈的微泡以定位释放,既增加了肝癌基因治疗的靶向性,又提高了外源基因的转染效率,从而增强了自杀基因对小鼠肝癌的杀伤效果.
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