【摘 要】
：
为了延长人促红细胞生成素(hEPO)体内半衰期以达到更好的药效,制备通过柔性接头相连接的重组人红细胞生成素-IgG1 Fc融合蛋白(rhEPO-L-Fc),并对其生物学活性和体内药动学进行
【机 构】
：
四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室,健能隆医药技术（上海）有限公司
论文部分内容阅读
为了延长人促红细胞生成素(hEPO)体内半衰期以达到更好的药效,制备通过柔性接头相连接的重组人红细胞生成素-IgG1 Fc融合蛋白(rhEPO-L-Fc),并对其生物学活性和体内药动学进行初步研究。利用PCR技术构建rhEPO-L-Fc融合基因,克隆至表达载体pOptiVEC-TOPO?,在二氢叶酸还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢细胞(CHO-dhfr?)表达。Protein A亲合层析柱纯化融合蛋白,SDS-PAGE、质谱、Western blotting鉴定表达产物,细胞增殖实验检测融合蛋白的体外活性,动物实验检测融合蛋白的体内活性和半衰期。成功构建pOptiVEC-TOPO?-rhEPO-L-Fc重组子,实现了在CHO细胞表达,纯化后的rhEPO-L-Fc融合蛋白经鉴定,其分子量和特异性均与理论值相符,能刺激体外培养的EPO依赖型细胞生长,ED50为2 ng/mL,且明显增加大鼠外周血网织红细胞数,体内消除半衰期达到27 h。rhEPO-L-Fc融合蛋白能延长hEPO体内半衰期,为其临床研究奠定了基础。
其他文献
<正> 黄磷生产的副产品电热水淬磷渣,是一种可供利用的工业废渣。随着有关应用技术的发展,它的用途越来越广泛。综合起来主要有: 1.磷渣作水泥混合材 磷渣作水泥混合材已纳入
<正>一、研究背景1、《中等职业学校英语教学大纲》、《中职英语课程标准》对情境教学、现代教育技术应用有明确要求。2009年1月,教育部最新修订的《中等职业学校英语教学大
<正> 日本江汉株式会社研制出两种新的第二代精密陶瓷,一种为“β-Salon”;另一种是“TiB_2”(二硼化钛),它能导电,且有很高的硬度。 “β-Sialon”是采用政府工业研究所的专
多西他赛为紫杉醇类抗肿瘤药,通过干扰细胞有丝分裂和分裂间期细胞功能所必需的微管网络而起到抗肿瘤作用,主要用于乳腺癌、卵巢癌及非小细胞肺癌、前列腺癌等实体肿瘤的化疗
针对海上盆地钻井资料少的特点．利用地温与地层深度或岩石圈底界深度的相关性，把钻井地热研究结果外推到无井区域，建立了东海西湖凹陷的区域地温场，并分析其对烃源岩的作用。研究
在社会经济发展过程中,交通工程发挥着十分重要的基础作用.特别是近些年来,我国交通工程建设数量不断增多,需要积极开展施工技术管理工作,全面提升交通工程的整体建设质量.
理论上讲，胚胎干细胞可以分化成各种组织细胞，形成各种器官。然而，从胚胎干细胞向不同组织细胞定向分化的条件还不清楚，从而限制了胚胎干细胞的临床应用。因此，干细胞研究的主要问
【正】 时代呼唤改革文学。每个有良知的文学家、每个与民族、与人民共命运的作家,都在响应呼唤,厉兵秣马,投身到改革大潮中,准备或着手创作改革文学。 但什么是改革文学呢?
鄂尔多斯盆地黑山墩地区存在上下2套构造系统，上下构造的分界线在Ts反射层附近，其中上构造层是地区勘探目标层。上构造系统断裂依据其规模可以分为三级；一级、二级断裂主要为近
大别山东南缘前陆盆地经历了由海相-海陆过渡相-陆相的演化历程,具有复合叠合盆地特征.从盆地层序上看,早中生代陆相前陆沉积体系下伏晚古生代海相被动陆缘沉积体系;从烃源岩