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抗隐孢子虫子孢子ScFv-PE40免疫毒素表达质粒的构建及其在大肠杆菌中的表达

来源 :寄生虫与医学昆虫学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：theonezhaoq

【摘 要】

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用PCR方法扩增抗隐孢子虫子孢子ScFv片段,插入表达载体pET-28a中,构建重组质粒pET-28-ScFv,然后,将绿脓杆菌外毒素(PE40)片段定向克隆到ScFv基因的下游,构建免疫毒素表达质粒

【作 者】

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尹继刚 张西臣 李建华 朱平 柳增善 

【机 构】

：

吉林大学畜牧兽医学院

【出 处】

：

寄生虫与医学昆虫学报

【发表日期】

：

2005年3期

【关键词】

：

隐孢子虫 子孢子 ScFv-PE40 免疫毒素 免疫毒素 表达质粒 隐孢子虫 子孢子 构建 大肠杆菌 ScFv基因 绿脓杆菌外毒素 PCR方法 Cryptosp 

【基金项目】

：

国家自然科学基金

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用PCR方法扩增抗隐孢子虫子孢子ScFv片段,插入表达载体pET-28a中,构建重组质粒pET-28-ScFv,然后,将绿脓杆菌外毒素(PE40)片段定向克隆到ScFv基因的下游,构建免疫毒素表达质粒pET28ScFv-PE40.经酶切分析、PCR检测和测序进行鉴定.成功地构建了免疫毒素表达质粒pET28 ScFv-PE40.将上述质粒转化受体菌BL21(DE3)后,经IPTG诱导,成功地表达了目的蛋白.免疫毒素ScFv-PE40大小约为66kDa,表达量约占菌体蛋白总量的14%.

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