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目的：探讨活血定眩胶囊（HXDX）对氧糖剥夺（OGD）诱导小鼠脑微血管内皮细胞株bEnd.3铁死亡的影响。方法：将bEnd.3细胞分为空白对照（control）组、OGD组、OGD+铁死亡抑制剂ferrostatin-1（Fer-1）组及OGD+HXDX组，control组细胞正常培养，其他组建立OGD模型，OGD+Fer-1组和OGD+HXDX组分别加入1μmol/L Fer-1和10%HXDX含药血清后OGD处理6 h。FerroOrange探针测定细胞内Fe2+水平，DCFH-DA探针检测活性氧（ROS）含量，试剂盒检测超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）和谷胱甘肽（GSH）水平，Western blot检测核因子E2相关因子2（Nrf2）、铁蛋白重链1（FTH1）、谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）、长链脂酰辅酶A合成酶4（ACSL4）、环加氧酶2（COX2）和NADPH氧化酶1（NOX1）蛋白表达。结果：与control组比较，OGD组bEnd.3细胞内Fe2+荧光强度与ROS含量显著增加；SOD活性降低，GSH表达下降，MDA含量显著增高（P<0.05）;FTH1和GPX4表达降低，ACSL4、COX2和NOX1表达升高（P<0.05）,Nrf2无显著差异。HXDX含药血清处理后，Fe2+水平和ROS含量显著降低（P<0.05）;SOD活性和GSH含量显著升高，MDA水平显著降低（P<0.05）;Nrf2、FTH1与GPX4蛋白的表达显著增高（P<0.05）,COX2和NOX1蛋白表达降低（P<0.05）,ACSL4无显著差异。结论：活血定眩胶囊可抑制体外OGD诱导的bEnd.3细胞铁死亡，其机制与降低细胞内Fe2+和ROS含量、减轻脂质过氧化及调控铁死亡相关蛋白表达有关。