利用GAD67-GFP基因敲入方法显示小鼠脊髓内表达GFP的GABA能神经元的分布

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γ氨基丁酸(GABA)是脊髓背角、前角内主要的抑制性神经递质.为了更好地观察脊髓背角内GABA能神经元的形态和功能,本研究使用了两种谷氨酸脱羧酶67绿色荧光蛋白(GAD67-GFP)基因敲入小鼠,并观察了敲入小鼠脊髓内的GFP表达状况.用免疫荧光组织化学双标记方法显示脊髓内所有的GFP阳性神经元基本上都呈GAD67和GABA阳性;GFP阳性神经元在脊髓背角的Ⅰ~Ⅲ层最为密集,背角深层内侧部及中央管周围呈中等密度分布,而在脊髓背角其它部位及前角则呈散在分布.脊髓内GFP阳性神经元的分布与GABA能神经元的分布一致.本文作者等还进一步在GAD67-GFP敲入小鼠中观察了GFP和神经元标志物神经元核蛋白(NeuN)的共存状况.脊髓背角内GFP阳性神经元分别占Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ层的NeuN阳性神经元的31.5%、33.3%和44.7%,与以往的GABA免疫组化研究结果基本一致.本研究表明GAD67 GFP基因敲入小鼠脊髓内的GFP在GAD67启动子的调节下正确地表达于GABA能神经元,该基因敲入小鼠可用于脊髓GABA能神经元的形态学特征和生理学特性及其发育规律等方面的研究.
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