【摘 要】
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目的 研究microRNA-129-5p(miR-129-5p)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠肺上皮细胞凋亡和自噬的影响.方法 取小鼠肺上皮细胞MLE-12,分别转染miR-129-5p模拟物(设为miR-129-5p mi组)和阴性对照寡核苷酸(设为miR-NC组),随后用500 ng·mL-1 LPS处理MLE-12细胞.用细胞计数法-8(CCK-8)检测各组细胞的增殖能力;用流式细胞术检测各组细胞的凋亡率;用蛋白质印迹(Western blot)法检测各组细胞中自噬相关蛋白P62和Bec-lin-1的
【机 构】
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浙江大学 医学院 附属第二医院 余杭院区感染科,浙江 杭州 311100;杭州市余杭区第一人民医院 感染科,浙江 杭州311100
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目的 研究microRNA-129-5p(miR-129-5p)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠肺上皮细胞凋亡和自噬的影响.方法 取小鼠肺上皮细胞MLE-12,分别转染miR-129-5p模拟物(设为miR-129-5p mi组)和阴性对照寡核苷酸(设为miR-NC组),随后用500 ng·mL-1 LPS处理MLE-12细胞.用细胞计数法-8(CCK-8)检测各组细胞的增殖能力;用流式细胞术检测各组细胞的凋亡率;用蛋白质印迹(Western blot)法检测各组细胞中自噬相关蛋白P62和Bec-lin-1的表达水平.结果 miR-NC组和miR-129-5p mi组细胞在24 h的细胞存活率分别为(52.73±1.41)％,(68.70±3.55)％,在48 h的细胞存活率分别为(48.75±7.22)％,(69.24±3.05)％,在72 h的细胞存活率分别为(48.22±4.28)％,(65.61±2.53)％;细胞凋亡率分别为(28.46±2.51)％,(17.24±2.06)％;P62蛋白的表达水平分别为1.01±0.03和1.54±0.07,Beclin-1蛋白的表达水平分别为0.98±0.09和0.52±0.05,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 过表达miR-129-5p可显著促进LPS诱导小鼠肺上皮细胞MLE-12增殖,并抑制细胞凋亡和自噬,从而改善LPS诱导的急性肺损伤.
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