【摘 要】
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低磷血症是人类磷代谢失常的常见疾病,成纤维细胞生长因子23 (fibroblast growth factor-23, FGF23)可以作用于肾曲小管减少肾脏对无机磷重吸收。保留C端73个氨基酸的FGF23C-ta
【基金项目】
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浙江省科技厅公益基金资助项目(LGF18H300005);江西省教育厅青年基金资助项目(GJJ170920)
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低磷血症是人类磷代谢失常的常见疾病,成纤维细胞生长因子23 (fibroblast growth factor-23, FGF23)可以作用于肾曲小管减少肾脏对无机磷重吸收。保留C端73个氨基酸的FGF23C-tail作为FGF23的抑制剂,可以增加肾脏对无机磷重吸收,因此FGF23C-tail在低磷血症的药物开发中显得尤为重要。本文首次将FGF23C-tail与人血清白蛋白(human serum albumin, HSA)融合,并尝试在毕赤酵母表达系统制备表达。融合PCR构建重组基因,经克隆株的抗性筛选和表达量筛选,获得一株毕赤酵母高产量的表达菌株,摇瓶的表达量为43.7 mg·L-1。5 L发酵罐的研究表明,表达量可高达265.6 mg·L-1。经三步纯化步骤后,获得纯度大于95%的FGF23C-tail-HSA融合蛋白。经宜春学院伦理委员会批准,蛋白的体内大鼠实验显示, FGF23C-tail-HSA具有FGF23抑制剂的功能,且能显著地提高大鼠的血磷水平。本研究为FGF23C-tail-HSA生理学活性的深入研究和FGF23C-tail的药物开发提供基础。
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