嗜热脂肪芽孢杆菌中普鲁兰酶的分离纯化

来源 :甘肃农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qwedddessf
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嗜热脂肪芽孢杆菌经细胞破碎机破壁后,采用硫酸铵盐析法除杂蛋白,DEAE-32阴离子交换纤维素纯化胞内普鲁兰酶,并通过L9(34)正交试验优化盐析除杂蛋白工艺条件.结果表明:菌体与缓冲液比1∶3、硫酸铵饱和度40%、pH值7.0分离效果最佳,其中,pH值对分离效果的影响差异性显著(F〉F0.05);纯化后的普鲁兰酶比活力为26.50U/mg,纯化倍数为8.01,回收率为73%;经SDS-PAGE检测,显示一条电泳区带,相对分子质量为55.4ku,表明获得了纯酶.
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