重组人内皮抑素在大肠杆菌中表达及其生物学活性鉴定

来源 :中国现代应用药学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：iq106

【摘要】

：

目的利用大肠杆菌原核表达系统表达重组人内皮抑素Endostatin,并对其进行生物学活性鉴定.方法采用RT-PCR方法从人胚肝中钓取人内皮抑素cDNA,将其克隆入pGEM-T Easy 克隆载体

【作者】

：

方唯意唐小卿杨慧玲曹守春曹建国

【机构】

：

南华大学基础医学院肿瘤所

【出处】

：

中国现代应用药学

【发表日期】

：

2003年2期

【关键词】

：

内皮抑素逆转录聚合酶链反应大肠杆菌原核表达系统抗血管生成活性 human endostatin RTPCR prokaryotic expression

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目的利用大肠杆菌原核表达系统表达重组人内皮抑素Endostatin,并对其进行生物学活性鉴定.方法采用RT-PCR方法从人胚肝中钓取人内皮抑素cDNA,将其克隆入pGEM-T Easy 克隆载体中;经全自动序列分析仪测序确证后,将人内皮抑素cDNA亚克隆入原核表达载体pWR450-1,构建含人内皮抑素cDNA的重组质粒;将该重组质粒转化入大肠杆菌TG1中进行诱导表达,表达产物经SDS-PAGE鉴定;表达产物初步纯化复性后以鸡胚尿囊膜血管生成抑制实验和小鼠伤口愈合实验对其进行生物学活性鉴定.结果成功获得54

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