【摘 要】
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本研究建立了一套检测进境水产品中典型异尖线虫DNA的恒温实时荧光环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法,根据LAMP方法原理,针对典型异尖线虫IT
【机 构】
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广州机场出入境检验检疫局国家水产品检测重点实验室; 暨南大学食品安全与营养研究院;
【基金项目】
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国家质量监督检验检疫总局科技计划项目(2015IK055);广东省科技项目(2014A040401063);广东检验检疫局科技项目(2017GDK42)
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本研究建立了一套检测进境水产品中典型异尖线虫DNA的恒温实时荧光环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法,根据LAMP方法原理,针对典型异尖线虫ITS2区域设计三套引物,特异性识别靶标基因。对比验证了典型异尖线虫、简单异尖线虫、短棘异尖线虫、抹香鲸异尖线虫、Anisakis nascettii、宫脂线虫、对盲囊线虫和颚口线虫的引物特异性;研究了模板浓度1 ng/μL至10 ag/μL的LAMP反应灵敏度,比传统的PCR方法高100倍;并在最低检测限1 fg/μL的质粒模板进行15次重复试验;对来自不同热带国家和地区的进境的41个实际样品进行测试,与传统PCR方法进行比较,假阳性率为0。恒温实时荧光快速检测方法适用于特异性检测典型异尖线虫。
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