丝状支原体丝状亚种SC型脂蛋白Q的N末端定点突变及表达载体的构建

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根据已发表的丝状支原体丝状亚种SC型(MmmSC)LppQ基因序列设计引物,从MmmSC HVRIx株中扩增出了LppQN末端基因,并将其分别克隆到pUC18和pUC19上,利用一步重叠延伸PCR突变方法将其66位的TGA突变为TGG,经克隆与序列测定证实突变成功后,将已突变的LppQN末端基因插入原核表达载体pET32a的多克隆位点,成功地构建了LppQN末端基因原核表达载体pET32a-LppQ,为其下一步体外表达奠定了基础。
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