嗜水气单胞菌温敏胞外蛋白酶活性片段的表达和对小鼠的免疫试验

来源 :农业生物技术学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:owenm87
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为确定嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,Ah)J-1株温敏胞外蛋白酶EprJ1的表达产物是否具有酶活性和抗原性及测定对小鼠的相对保护率,根据eprJ1基因ORF阅读框的序列设计1对引物,扩增出不含信号肽序列的EprJ1成熟蛋白结构基因(850bp),经EcoRⅠ/Sal Ⅰ双酶切后连接pET-32a(+),转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21。在30℃经IPTG诱导后,重组菌冻融液在脱脂奶平板上经28℃和24h孵育检测有透明溶蛋白圈出现,经56℃和30min处理后
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