【摘 要】
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目的 探讨灯盏花素对紫杉醇耐药非小细胞肺癌细胞的作用及其延缓紫杉醇耐药的相关潜在机制.方法 用不同浓度灯盏花素作用A549细胞和紫杉醇耐药A549(A549/紫杉醇)细胞,采用MTT法检测灯盏花素对A549/紫杉醇细胞生长活力及对紫杉醇敏感性的影响;流式细胞术检测灯盏花素对A549/紫杉醇细胞凋亡及细胞周期的影响;免疫印迹法检测细胞凋亡、细胞周期相关蛋白表达;胞浆胞核分离实验检测灯盏花素对核因子(nuclear factor,NF)-κB p65核入位的影响;表面等离子共振(surface plasmon
【机 构】
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秦皇岛市第一医院胸外科,河北秦皇岛066000
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目的 探讨灯盏花素对紫杉醇耐药非小细胞肺癌细胞的作用及其延缓紫杉醇耐药的相关潜在机制.方法 用不同浓度灯盏花素作用A549细胞和紫杉醇耐药A549(A549/紫杉醇)细胞,采用MTT法检测灯盏花素对A549/紫杉醇细胞生长活力及对紫杉醇敏感性的影响;流式细胞术检测灯盏花素对A549/紫杉醇细胞凋亡及细胞周期的影响;免疫印迹法检测细胞凋亡、细胞周期相关蛋白表达;胞浆胞核分离实验检测灯盏花素对核因子(nuclear factor,NF)-κB p65核入位的影响;表面等离子共振(surface plasmon resonance,SPR)技术分析灯盏花素与IκB激酶β(IκB kinase β,IKKβ)的结合关系.结果 灯盏花素可抑制A549/紫杉醇细胞生长活力且呈时间-浓度依赖性(P＜0.05).随着灯盏花素浓度的升高,紫杉醇对A549/紫杉醇细胞的半抑制浓度值逐渐下降(P＜0.05).与灯盏花素和紫杉醇单独作用相比,灯盏花素联合紫杉醇作用明显促进了A549/紫杉醇细胞凋亡,上调凋亡相关蛋白切割半胱氨酸蛋白酶-3、切割半多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶表达,下调抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤2表达(P＜0.05);联合作用显著增加了 A549/紫杉醇细胞周期阻滞在G1期,降低细胞周期相关蛋白细胞周期素D1、周期素依赖性激酶4表达(P＜0.05).灯盏花素抑制1KKβ、IκB磷酸化,减少NF-κB p65核入位.灯盏花素与IKKβ野生型纯化蛋白直接结合,紫杉醇联用灯盏花素可逆转单纯紫杉醇对IKKβ/NF-κB通路的活化.结论 灯盏花素能够抑制A549/紫杉醇细胞生长,阻碍细胞周期停滞在G1期,促进细胞凋亡,可提高A549/紫杉醇细胞对紫杉醇的敏感性.灯盏花素可能通过抑制A549/紫杉醇细胞中IKKβ、IκB磷酸化及NF-κB p65核入位,进而抑制IKKβ/NF-κB通路活化来延缓对紫杉醇的耐药.
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