西尼罗病毒荧光定量PCR检测体系的建立及评价

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建立了一种实时荧光定量PCR快速检测西尼罗病毒( West nile virus, WNV)的方法。通过序列比对和blast分析,确定WNV Caspid蛋白保守区基因为检测的目的基因,引物采用Primer Premier5.0软件设计。利用成本相对较低的SYBR Green Ⅰ染料法建立WNV核酸检测方法。通过对标准品的扩增、测序及对标准扩增曲线的绘制,建立WNV核酸检测体系。同时对建立的检测体系进行了检测特异性、灵敏度和重复性分析。将阳性对照标准品进行10倍梯度稀释后可检测到10^2 copies/μ
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