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StuDl蛋白原核可溶性表达及其IgG抗体检测应用

来源 :检验医学与临床 | 被引量 : 0次 | 上传用户：hulan2010
【摘 要】
：
目的获取可溶性SmDl重组蛋白，并建立抗SmDl抗体ELISA检测方法。方法采用PCR方法扩增SmDl基因，构建表达质粒pET-21a-SmDl，转化到大肠杆菌BL21，在16℃条件下，1mMIPTG诱导表达10h，SDS-
【作 者】
：
范见佩 钟运华 汤文辉 杨自华 
【机 构】
：
广东省吴川市妇幼保健院,广州中医药大学,广东省吴川市人民医院,广东省深圳市人民医院
【出 处】
：
检验医学与临床
【发表日期】
：
2014年A02期
【关键词】
：
SmDl 系统性红斑狼疮 原核表达 StuD1  systemic lupus erythematosus  prokaryotic expression 
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目的获取可溶性SmDl重组蛋白，并建立抗SmDl抗体ELISA检测方法。方法采用PCR方法扩增SmDl基因，构建表达质粒pET-21a-SmDl，转化到大肠杆菌BL21，在16℃条件下，1mMIPTG诱导表达10h，SDS-PAGE电泳分析表达产物，镍柱亲和层析纯化，Bradford法测定蛋白浓度，建立间接ELISA法，检测215例常见自身免疫性疾病血清样本。结果通过双酶切和测序结果表明成功构建表达质粒pET-21a-SmDl，SDS-PAGE电泳得知目的蛋白以可溶性表达为主，经镍柱纯化获得单一目的蛋白，
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