血红素氧合酶-1蛋白转导对大鼠海马神经元氧糖缺失/复氧复糖损伤的影响

来源 :中华麻醉学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:WUTEK2008
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目的 探讨血红素氧合酶-1(HO-1)蛋白转导对大鼠海马神经元氧糖缺失/复氧复糖损伤的影响.方法 采用pET-21a(+)-p53-11R质粒(11R质粒)构建11R-HO-1质粒,鉴定和收集11R-HO-1融合蛋白.采用随机数字表法将培养7d的大鼠海马神经元分为5组(n=171):氧糖缺失/复氧复糖组(OGD/R组)、生理盐水组(NS组)、11R质粒组(11R组)、300 nmol/L 11R-HO-1组(H1组)、1 500nmol/L 11R-HO-1组(H2组).NS组、11R组、H1组和H2组神经元分别经300 nmol/L生理盐水、300nmol/L11R质粒、300 nmol/L11R-HO-1融合蛋白、1 500 nmol/L 11R-HO-1融合蛋白孵育2h后制备氧糖缺失/复氧复糖模型.神经元用5% CO2-95%N2饱和的无糖/无氧DMEM液和5% CO2-95%N2培养箱孵育45 min,随后更换回高糖型DMEM培养液放置于37℃、5%CO2-95%空气培养箱培养24h,以制备氧糖缺失/复氧复糖损伤模型.模型制备结束即刻采用MTT法检测神经元存活率,TUNEL法检测神经元凋亡率,Western blot法检测HO-1和caspase-3蛋白的表达水平.结果 与OGD/R组比较,H1组和H2组神经元存活率升高,凋亡率降低,caspase-3蛋白表达下调,HO-1蛋白表达上调(P<0.05),NS组和11R组上述指标差异无统计学意义(P>0.05);与H1组比较,H2组神经元存活率升高,凋亡率降低,caspase-3蛋白表达下调,HO-1蛋白表达上调(P<0.05).结论 HO-1蛋白转导可减轻大鼠海马神经元氧糖缺失/复氧复糖损伤。

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