猪传染性胸膜肺炎放线杆菌apxⅡ^-/Amp^r突变株的构建

来源 :畜牧兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qiansujiao
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根据已发表的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)血清5型核苷酸序列设计并合成了一对引物,从自行分离的APP菌株PCR扩增apxⅡCA基因,将该片段与pBluescript SK(+)载体连接,得到质粒pSK-CA.另外,从质粒pIC-neo中得到的Ampr基因经XbaⅠ酶切消化后,克隆到pSK-CA中的XbaⅠ位点,获得了重组转移质粒pSK-CAmpr.pSK-CAmprDNA通过电转化导入亲本菌,电转化后的产物涂布于TM平板,可获得突变株.提取突变株和亲本菌基因组DNA,用PCR检测含有apxⅡC基因的胸
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