【摘 要】
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目的构建正、反义hTERT基因真核表达载体,为进一步研究端粒酶的活性调节与恶性肿瘤基因治疗作准备.方法根据已发表在Genebank的hTERT cDNA序列,设计并合成了1对两端带特定限
【机 构】
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深圳市儿童医院,中山大学医学院病理教研室
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目的构建正、反义hTERT基因真核表达载体,为进一步研究端粒酶的活性调节与恶性肿瘤基因治疗作准备.方法根据已发表在Genebank的hTERT cDNA序列,设计并合成了1对两端带特定限制性酶切位点引物,提取子宫颈癌HeLa细胞株总RNA,进行RT-PCR,并将扩增产物TA首先克隆至pGEMR-T载体,然后双酶切pGEM-T载体回收目的片段再克隆至真核表达质粒pcDNA3.1(±)中,并对重组体进行酶切鉴定和测序分析.结果 PCR扩增片段与预期结果相符,双酶切证实构建的正、反义hTERT基因真核
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