【摘 要】
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目的探讨人PHF8蛋白的原核表达、纯化与结晶条件。方法用分子克隆的方法构建重组质粒PHF8/pet28b,测序鉴定正确后将其转入Rosetta 2（DE3）,IPTG诱导表达融合蛋白。对融合蛋白进
【机 构】
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中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室,中国农业大学生物学院农业生物技术国家重点实验室
【基金项目】
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国家重点实验室专项经费（2060204）
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目的探讨人PHF8蛋白的原核表达、纯化与结晶条件。方法用分子克隆的方法构建重组质粒PHF8/pet28b,测序鉴定正确后将其转入Rosetta 2（DE3）,IPTG诱导表达融合蛋白。对融合蛋白进行分离纯化结晶,衍射分析,并用计算机软件解析其晶体结构。结果经过诱导,含有PHF8/pet28b的Rosetta 2在原核表达系统中表达出了相对分子质量为40 ku的c-PHF8融合蛋白,c-PHF8在合适的悬滴条件下得到六方柱晶体。结论利用原核表达体系成功地表达了人PHF8催化活性中心结构域并获得结晶,为进一步
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