【摘 要】
:
为开发可用于小反刍兽疫病毒(PPRV)诊断及其抗原的检测方法,参考 GenBank 中PPRV Nigeria 75/1 株N 基因序列设计引物,采用 RT-PCR方法获得目的基因后连接到载体pCzn1中,转化到大
【机 构】
:
宁夏大学农学院; 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室; 安徽农业大学动物科技学院;
【基金项目】
:
国家重点基础研究发展计划(937计划)项目(2018YFD0502000);国家现代肉羊产业体系建设项目(CARS-39-04B);甘肃省草食畜牧产业体系项目(GARS08)
论文部分内容阅读
为开发可用于小反刍兽疫病毒(PPRV)诊断及其抗原的检测方法,参考 GenBank 中PPRV Nigeria 75/1 株N 基因序列设计引物,采用 RT-PCR方法获得目的基因后连接到载体pCzn1中,转化到大肠杆菌DH5α克隆菌株,经PCR和双酶切鉴定测序后,将阳性克隆转化至大肠杆菌BL21 (DE3) 菌株后采用IPTG进行诱导表达。结果表明,成功地构建了含有小反刍兽疫病毒 N基因的重组质粒pCzn1-N;诱导条件经过优化后N蛋白为可溶性表达,重组蛋白大小约为64 ku,能够与PPRV阳性血清较好地反应;制备的家兔多克隆抗体效价为1∶128 000,经过纯化后抗体效价为1∶64 000且具有较高的结合特异性;用间接ELISA和Western-blot,对N蛋白纯化后制备的家兔多克隆抗体进行分析,发现重组的N蛋白免疫原性良好,且制备的多克隆抗体特异性良好。这表明重组的N蛋白具有较高的特异性及反应活性。
其他文献
<正>本文分析了人民币汇率两轮贬值的特征,同时从市场情绪与预期、国际收支、央行政策以及经济基本面四个维度构建了人民币汇率分析框架。从分析结果看,与上轮相比,本轮汇率
3G技术的应用为手机报的飞跃式发展提供了机遇。但从手机报自身的长远发展来看,深度挖掘手机报的内容表现力才是3G时代手机报安身立命之本,其内容开发必须围绕新闻和服务两大
电视新闻的优势在于画面语言的冲击力和同步传播的时效性。作为在现场参与新闻传播的出镜记者,在电视新闻报道中所发挥的作用越来越重要、面临的考验也越来越严峻。本文通过
本文利用波长色散X射线荧光光谱仪对北京、江苏、辽宁、湖北、安徽等13个省市398个古代建筑琉璃构件胎体的化学组成进行测试,将测试数据进行因子分析和胎式组成分析,得到我国
电视栏目策划,是栏目制作部门准备或进行栏目运作的首要环节。如何做好栏目策划,是电视台和专业制作部门在栏目改版和新节目推出前面临的主要课题。栏目策划方案的优劣,对今
中国新疆莎车县境内,1993年5月发现中生代侏罗纪下统的下部,距今约1.95亿年琥珀。使世界已知琥珀产地的地质年代,由中国河南省西峡县产于白垩纪上统底部琥珀距今约8850万年,
如今的机械工程领域,因为微电子与计算机技术的全面应用,机械工业正朝着机电一体化方向发展,使机械工业的技术构架、功能及生产方式等模式有了翻天覆地的变化,也使工业生产逐渐侧
内四川盆地奥陶系十字铺组和宝塔组自上世纪20年代命名以来,在地层学界一直被认为是连续沉积,整合接触。四川盆地东-南缘中-上奥陶统习水良村和武隆黄草两条剖面的牙形石生物地
<正> 1、选种催芽 白术系用种子繁殖。通常以株选为主。播前再结合选用籽粒饱满、色泽新鲜、成熟一致,且无病虫蛀的新种(陈种生活力弱,发芽率低,不宜选用),置于25~30℃温水中