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目的 观察KISS-1基因对结肠癌细胞株HT29体外表达的作用和对其生物学功能的影响.方法 通过基因转染法使KISS-1在结肠癌细胞株HT29中稳定表达,应用噻唑蓝(MTT)法和Transwell侵袭实验检测KISS-1表达对结肠癌细胞株HT29的增殖和侵袭能力的作用和影响;通过免疫组织化学法和实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)技术检测KISS-1基因mRNA在体外结肠癌细胞株HT29中的表达水平,并用Real-time PCR测定转染后结肠癌细胞株HT29中c-fos、c-jun mRNA水平表达变化,并通过显微镜、透射电镜等观察凋亡细胞的形态学改变.结果 (1)Real-time PCR和免疫细胞组织化学证实转染后结肠癌细胞中有KISS-1稳定表达.(2)MTt法表明:培养0、24 h时各组HT29细胞数差异无统计学意义(P＞0.05),48 h后,随着培养时间延长,转染组HT29细胞数明显低于空白对照组与阴性对照组(P＜0.05),而空白对照组与阴性对照组HT29细胞数差异无统计学意义(P＞0.05).(3) Transwell侵袭实验结果:转染KISS-1基因的结肠癌细胞HT29穿透Matrigel基底膜的细胞数显著低于空质粒转染组及空白对照组细胞(P＜0.01),侵袭指数显著降低(P＜0.01),侵袭力抑制率达到56.5％,显著低于空质粒转染组及空白对照组细胞(P＜0.01).空质粒转染组及空白对照组细胞比较,侵袭穿膜细胞数差异无统计学意义(P＞0.05).(4)KISS-1作用于结肠癌细胞株HT29 24 h后,形态学观察结肠癌细胞株HT29发生凋亡或坏死.(5)Real-time PCR:转染组c-jun和c-fos吸光度值为0.87 ±0.16和0.44±0.12,阴性对照组吸光度值为1.82±0.39和1.76±0.34,空白对照组吸光度值为1.65±0.36和1.58±0.31.与对照组比较,转染组c-jun和c-fos扩增产物条带吸光度值均显著降低(P＜0.01).结论 KISS-1基因对体外结肠癌细胞株HT29具有抑制增殖和促进凋亡作用,其可能是通过负性调控信号通路降低结肠癌细胞中c-fos、c-jun的表达.