人内质网分子伴侣BiP的克隆、表达及其在RA患者血清抗体检测中的作用

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以类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者滑膜组织文库cDNA为模板,用PCR方法扩增得到1965bp人内质网分子伴侣BiP的全长cDNA,将其克隆入OmiesLink^TM表达载体pReceiver—B01a,构建重组表达质粒pReceiver—B01a—BiP。重组表达质粒导人大肠杆菌BL-21(DE3)菌株中诱导表达目的蛋白,表达产物以Ni^+-NTA agarose层析柱纯化。SDS-PAGE和免疫印迹法(Western blot)分析发现,表达产物以可溶性蛋白和包涵体形
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