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为建立鸡高迁移率族蛋白1（chHMGB1）蛋白酶联免疫定量分析方法，本研究原核表达重组chHMGB1蛋白（rchHMGB1）。以纯化的rchHMGB1作为免疫原分别免疫BABL／c小鼠和新西兰大白兔以分别制备针对rchHMGB1的鼠单克隆抗体（MAb）和兔多克隆抗体（PAb），并对兔PAb进行辣根过氧化物酶（HRP1标记。以鼠抗rchHMGB1MAb做为包被抗体，HRP标记兔PAb为检测抗体，建立了定量测定rchHMGB1的双抗体夹心ELISA方法。对该方法进行了特异性、检测限和稳定性等试验。结果显示，包