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摘要:鸡病理解剖及镜检是全国职业院校技能大赛中农业类参赛项目之一,每年都有省赛、国赛举行。同时,这一技能在家禽生产实践中也非常实用,是畜牧兽医相关专业学生的必備技能之一。近几年,我校师生在云南省赛中曾获得二等奖、三等奖的成绩,现根据本人的参赛经验,对比赛考核内容作出分析,供以后参赛师生参考。
关键词:鸡;病理解剖;镜检;技能大赛
根据参赛规程中的要求,整个参赛过程为90分钟,满分100分。通过分析鸡病理剖检项目考核要点及分值,可以看出,考官对参赛考生的打分主要根据6项评价要素,共14项考核内容,现对这些内容作如下剖析。
1 鸡的病理剖解(22分)
这一项目是6项评价要素中分值最高的,共包括4方面的考核内容。这也是参赛选手最为重视的环节,一般在参赛前都会训练若干次。在此需要注意的是训练时鸡的品种、日龄、健康状况等应尽可能的多样化,参赛规程中明确指出比赛用鸡为健康或带毒鸡,但每年的比赛用鸡都有所不同,如2018年云南省赛中为淘汰蛋鸡,2019年为71日龄的金陵铁脚麻。
1.1病死鸡外观检查操作规范(4分)
参赛选手按照抽签顺序领取鸡到解剖台后,计时开始,即开始鸡的外观检查。
首先观察鸡的整体精神状态,全身羽毛状况(有光泽、蓬乱、脱毛、泄殖腔周围粪便污染等),有无脱肛现象,鸡冠、肉髯、脸部、眼睑的状况(颜色、有无痘疹、肿胀等),眼结膜是否潮红、出血,口腔、鼻腔(可适当挤压)有无分泌物,脚部关节、脚趾有无骨折、肿胀、扭曲、变形、鳞片出血等;然后可适当拨开羽毛,观察皮肤表面有无淤血、出血、结痂、肿瘤等。
外观检查结束后,随即将鸡放血处死,主要采用两种方法。上颌静脉放血、颈静脉放血。无论采取哪种放血方式,充分放血时间一般为2-3分钟,即可见鸡剧烈挣扎,排粪动作,随即死亡。这一过程要注意放血后一定要将鸡头固定住,鸡脚提高,在指定区域充分放血,不能将鸡血到处溅飞。
1.2 病死鸡消毒方法正确、摆放得当(4分)
将鸡处死后,为防止解剖过程中绒毛、尘埃飞扬,应先将整只鸡完全浸入消毒液中,将羽毛和皮肤表面浸湿后取出,随后放入解剖瓷盘。尸体在瓷盘中以仰卧放置,将大腿内侧皮肤切开后用力掰开两腿,使鸡髋关节脱位,将尸体固定。
1.3 剖检方法正确、操作规范(10分)
这一步骤相对耗时较长,而且细节很多,不仅要求能正确识别鸡的各个脏器、组织的正常位置、形态、色泽、大小,还要对常见的组织、器官的病理变化有一定的认识和鉴别。
皮下检查: 将胸骨嵴部皮肤提起,用手术剪纵行剪开皮肤并向前、后延伸,用手剥离皮肤,将颈、胸、腹部和腿部肌肉完全暴露。观察皮下有无出血和水肿,龙骨是否弯曲和变形。胸部、腿部肌肉颜色是否正常(正常为粉红偏白色),表面有无出血点或出血斑。嗉囊是否充盈,内容物数量及性状如何。胸腺的大小及颜色,有无出血和坏死(法氏囊炎、新城疫有出血,传染性贫血时萎缩)。
组织、脏器检查:在后腹部,用手术剪将腹壁横行切开,顺切口的两侧分别向前剪断胸肋骨,乌喙骨和锁骨,取下胸肌,暴露胸体腔。观察胸腔、腹腔内有无出血点、出血斑、血凝块,腹腔内大量清澈透明或淡黄色液体(肝硬化、腹水症),大量纤维素样渗出物并伴有各脏器粘连(大肠杆菌、沙门氏菌、腹膜炎),各脏器、组织的位置、形态、大小、颜色是否正常。
气囊:正常为清澈透明,如有增厚、混浊、渗出物、干酪样团块等可怀疑大肠杆菌、曲霉菌、支原体等。
肝脏:正常为鲜红略带紫色,表面光滑、湿润,质地均匀。病理情况常见于禽霍乱(肿大、表面及实质有黄色针尖大小坏死灶)、鸡白莉(表面有白色小点)、内脏型马立克氏病(表面及实质可见黄豆粒大小肿瘤结节)、产蛋鸡脂肪肝(呈土黄色、质地较脆)、肉鸡腹水症后期(肝脏萎缩、硬化)。
胆囊:正常为暗绿色,长椭圆状,胆汁充盈,禽伤寒、大肠杆菌病等可见肿大。
心脏:正常情况下心包膜和心脏间有少量液体,无粘连。常见病变有心包内有黄色纤维素样物渗出(白莉、大肠杆菌等),心尖、心冠脂肪有出血点、出血斑(禽流感、新城疫、禽霍乱、伤寒等),心肌肿瘤(马立克氏病)。
脾脏:为椭圆形,暗红色,质地均匀。病变可见表面有白色点、白色结节(马立克氏病、禽结核等),肿大(败血症等)。
肺脏:为粉红色,质地柔软。表面有灰白色结节(鸡白莉),表面或实质有肿瘤(马立克氏病),水肿(肉鸡腹水症)。
肾脏:为暗红色,长条状。肾肿大、有尿酸盐沉积形成花斑肾(肾型传染性支气管炎、沙门氏菌、传染性法氏囊炎等),肿瘤结节(马立克氏病)。
腺胃:腺胃乳头出血(高致病性禽流感、新城疫),腺胃、肌胃交界处带状出血(禽流感、新城疫、法氏囊炎等),乳头及乳头间有肿瘤结节(马立克氏病)。
肌胃:角质层下有出血、溃疡灶(典型新城疫、禽流感等),角质层糜烂(霉菌感染、药物中毒)。
嗉囊:光滑、有弹性。肿大、下垂(白色念珠菌感染),表面散在小结节(维生素缺乏)。
小肠:十二指肠、卵黄蒂后侧、回肠起始处见枣核状出血、溃疡(非典型新城疫),小肠粘膜出血(球虫病、新城疫、禽流感、中毒等),小肠肿胀(球虫病)。
盲肠:肿胀、出血、形成血便(球虫),同心圆状干酪物(盲肠肝炎)。盲肠扁桃体肿胀、坏死、出血(新城疫)。
睾丸:左右基本对称,表面光滑。萎缩、脓肿(鸡白莉)。
卵巢:菜花样肿胀(马立克氏病),卵巢萎缩(沙门氏菌、新城疫、产蛋下降综合征等)。卵泡:充血、出血(禽霍乱),萎缩呈绿色(沙门氏菌)。
输卵管:右侧输卵管退化后呈水泡样。充满腐败渗出物、干酪物(沙门氏菌、大肠杆菌),系膜形成肿瘤(马立克氏病),水肿、形成水泡(产蛋下降综合征、传染性支气管炎)。 法氏囊:4月龄达最大后逐渐萎缩。出血、水肿、坏死、呈紫葡萄状或胶冻样(传染性法氏囊炎、新城疫、大肠杆菌等)。
鼻腔:在两鼻孔上方横断鼻腔,检查鼻甲骨,挤压鼻腔两侧,观察鼻腔分泌物及形状。流粘液、鼻甲骨肿大、变黑(传染性鼻炎),渗出物增多(禽流感等)。
口腔:剪开一侧口角,观察喉头、气管等。喉头出血,粘膜增厚(传染性喉气管炎),气管后段横纹出血、充血(传染性支气管炎),气管内有奶油样或干酪样渗出物(新城疫等)。
脚部关节:关节是否肿胀。脑部检查:脑膜是否充血、出血,小脑是否出血、软化。坐骨神经:为白色带状、有横纹、光滑、两侧对称。马立克氏病时有肿大变粗、横纹消失、呈灰白色或黄色。
1.4 桌面整洁(4分)
要求解剖过程在瓷盘内完成,所分离的器官、组织在瓷盘内摆放有序,所用器械洗净归位。
2 制备肝组织触片(20分)
制作肝组织触片的肝脏要在打开胸腹腔后及时完成采样,为了尽可能减少污染,采样时要点燃酒精灯,在火焰旁操作,可用无菌手术剪和镊子将肝脏表面病理变化较为明显的部分取下后放入无菌培养皿,备用。
2.1 无菌操作规范(10分)
将放有肝脏的无菌培养皿放置在酒精灯旁,点燃酒精灯,将载玻片于火焰上端轻微灼烧后备用,将手术剪和镊子于外焰灼烧后备用。
2.2 肝脏组织采样操作规范(5分)
用手术剪烫灼所选定的肝组织表面,再次将手术剪灼烧后适当降温,在经烫灼的区域剪下约1cm×1cm的肝组织,再用镊子夹住肝组织在载玻片上轻触一下,风干后备用。
2.3 触片的大小、厚度适宜(5分)
触片大小不宜超过1cm2,厚度不宜过厚(轻触后,肉眼可见载玻片表面有一层浑浊物,若可见很多颗粒性物质则过厚)。
3 染色(10分)
采用瑞氏染色法。
3.1 触片处理方法正确(2分)
为了使染色液不分散,先要用蜡笔在触片两端分别划一直线,后将载玻片放于染色缸上,备用。
3.2 染色流程正确规范(5分)
先滴加适量A液与涂片上,染色1分钟;再滴加2-3倍量的B液,用吸耳球充分混匀,染色3-5分钟;取出后蒸馏水冲洗(水流从触片区域上端留下,不可直接冲洗触片区域),用吸水纸轻放于触片表面吸干,备用。
3.3 触片制作效果(3分)
在镜检视野中,细菌、细胞核呈蓝色;嗜酸性颗粒呈粉红色或橘红色;淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质为紫蓝色或蓝色;完全成熟的红细胞呈粉红。
4 镜检(20分)
4.1 显微镜操作规范(10分)
打开显微镜后,将肝组织触片放于载物台;先将低倍物镜(4X)对准触片区域,上下调节粗准焦螺旋后找到视野;再将镜头调至高倍镜(40X),微调细准焦螺旋后确定视野;将物镜旋转开,滴一滴香柏油于触片上,再将物镜调至油镜,再次微调细准焦螺旋后确定视野。
4.2 视野清楚(10分)
视野中呈现的效果和肝组织触片制作、染色时间都有关,不可一概而论。参考:在油镜视野下,可见大量核呈紫红色,胞质淡蓝色的肝细胞;少量核呈紫色,胞质淡粉色的紅细胞;有的还可看到呈空泡状的脂肪细胞;如果有细菌,则呈蓝色。
5 病料处理方法规范及合理(8分)
病料应根据危害程度进行无害化处理。比赛中只需按要求摆放至指定地点,由主办方统一处理。
6 鸡病理剖检记录表(20分)
遵循原则为:看到什么就写什么。切忌以点概面,妄下结论。
6.1 外观及剖检病变识别准确(10分)
用简洁的语言,将上述外观检查结果和各组织、脏器的检查结果用文字表现出来。
6.2 报告填写规范,完整,综合结论正确(10分)
外观检查记录、剖检检查记录、显微镜检查结果、病理解剖学诊断与结论之间是前后呼应的,切忌自相矛盾。此外,记录表中只能填写抽签号,一旦出现参赛选手名字,则判为零分。
总的看来,本项技能大赛中,整个解剖过程和各个组织、脏器的识别、镜检操作的难度都不算大。而难点在于正确识别不同疾病的病变特征、病理变化,以及最终得出正确的结论,这就需要不断积累专业理论知识和生产实践经验。
关键词:鸡;病理解剖;镜检;技能大赛
根据参赛规程中的要求,整个参赛过程为90分钟,满分100分。通过分析鸡病理剖检项目考核要点及分值,可以看出,考官对参赛考生的打分主要根据6项评价要素,共14项考核内容,现对这些内容作如下剖析。
1 鸡的病理剖解(22分)
这一项目是6项评价要素中分值最高的,共包括4方面的考核内容。这也是参赛选手最为重视的环节,一般在参赛前都会训练若干次。在此需要注意的是训练时鸡的品种、日龄、健康状况等应尽可能的多样化,参赛规程中明确指出比赛用鸡为健康或带毒鸡,但每年的比赛用鸡都有所不同,如2018年云南省赛中为淘汰蛋鸡,2019年为71日龄的金陵铁脚麻。
1.1病死鸡外观检查操作规范(4分)
参赛选手按照抽签顺序领取鸡到解剖台后,计时开始,即开始鸡的外观检查。
首先观察鸡的整体精神状态,全身羽毛状况(有光泽、蓬乱、脱毛、泄殖腔周围粪便污染等),有无脱肛现象,鸡冠、肉髯、脸部、眼睑的状况(颜色、有无痘疹、肿胀等),眼结膜是否潮红、出血,口腔、鼻腔(可适当挤压)有无分泌物,脚部关节、脚趾有无骨折、肿胀、扭曲、变形、鳞片出血等;然后可适当拨开羽毛,观察皮肤表面有无淤血、出血、结痂、肿瘤等。
外观检查结束后,随即将鸡放血处死,主要采用两种方法。上颌静脉放血、颈静脉放血。无论采取哪种放血方式,充分放血时间一般为2-3分钟,即可见鸡剧烈挣扎,排粪动作,随即死亡。这一过程要注意放血后一定要将鸡头固定住,鸡脚提高,在指定区域充分放血,不能将鸡血到处溅飞。
1.2 病死鸡消毒方法正确、摆放得当(4分)
将鸡处死后,为防止解剖过程中绒毛、尘埃飞扬,应先将整只鸡完全浸入消毒液中,将羽毛和皮肤表面浸湿后取出,随后放入解剖瓷盘。尸体在瓷盘中以仰卧放置,将大腿内侧皮肤切开后用力掰开两腿,使鸡髋关节脱位,将尸体固定。
1.3 剖检方法正确、操作规范(10分)
这一步骤相对耗时较长,而且细节很多,不仅要求能正确识别鸡的各个脏器、组织的正常位置、形态、色泽、大小,还要对常见的组织、器官的病理变化有一定的认识和鉴别。
皮下检查: 将胸骨嵴部皮肤提起,用手术剪纵行剪开皮肤并向前、后延伸,用手剥离皮肤,将颈、胸、腹部和腿部肌肉完全暴露。观察皮下有无出血和水肿,龙骨是否弯曲和变形。胸部、腿部肌肉颜色是否正常(正常为粉红偏白色),表面有无出血点或出血斑。嗉囊是否充盈,内容物数量及性状如何。胸腺的大小及颜色,有无出血和坏死(法氏囊炎、新城疫有出血,传染性贫血时萎缩)。
组织、脏器检查:在后腹部,用手术剪将腹壁横行切开,顺切口的两侧分别向前剪断胸肋骨,乌喙骨和锁骨,取下胸肌,暴露胸体腔。观察胸腔、腹腔内有无出血点、出血斑、血凝块,腹腔内大量清澈透明或淡黄色液体(肝硬化、腹水症),大量纤维素样渗出物并伴有各脏器粘连(大肠杆菌、沙门氏菌、腹膜炎),各脏器、组织的位置、形态、大小、颜色是否正常。
气囊:正常为清澈透明,如有增厚、混浊、渗出物、干酪样团块等可怀疑大肠杆菌、曲霉菌、支原体等。
肝脏:正常为鲜红略带紫色,表面光滑、湿润,质地均匀。病理情况常见于禽霍乱(肿大、表面及实质有黄色针尖大小坏死灶)、鸡白莉(表面有白色小点)、内脏型马立克氏病(表面及实质可见黄豆粒大小肿瘤结节)、产蛋鸡脂肪肝(呈土黄色、质地较脆)、肉鸡腹水症后期(肝脏萎缩、硬化)。
胆囊:正常为暗绿色,长椭圆状,胆汁充盈,禽伤寒、大肠杆菌病等可见肿大。
心脏:正常情况下心包膜和心脏间有少量液体,无粘连。常见病变有心包内有黄色纤维素样物渗出(白莉、大肠杆菌等),心尖、心冠脂肪有出血点、出血斑(禽流感、新城疫、禽霍乱、伤寒等),心肌肿瘤(马立克氏病)。
脾脏:为椭圆形,暗红色,质地均匀。病变可见表面有白色点、白色结节(马立克氏病、禽结核等),肿大(败血症等)。
肺脏:为粉红色,质地柔软。表面有灰白色结节(鸡白莉),表面或实质有肿瘤(马立克氏病),水肿(肉鸡腹水症)。
肾脏:为暗红色,长条状。肾肿大、有尿酸盐沉积形成花斑肾(肾型传染性支气管炎、沙门氏菌、传染性法氏囊炎等),肿瘤结节(马立克氏病)。
腺胃:腺胃乳头出血(高致病性禽流感、新城疫),腺胃、肌胃交界处带状出血(禽流感、新城疫、法氏囊炎等),乳头及乳头间有肿瘤结节(马立克氏病)。
肌胃:角质层下有出血、溃疡灶(典型新城疫、禽流感等),角质层糜烂(霉菌感染、药物中毒)。
嗉囊:光滑、有弹性。肿大、下垂(白色念珠菌感染),表面散在小结节(维生素缺乏)。
小肠:十二指肠、卵黄蒂后侧、回肠起始处见枣核状出血、溃疡(非典型新城疫),小肠粘膜出血(球虫病、新城疫、禽流感、中毒等),小肠肿胀(球虫病)。
盲肠:肿胀、出血、形成血便(球虫),同心圆状干酪物(盲肠肝炎)。盲肠扁桃体肿胀、坏死、出血(新城疫)。
睾丸:左右基本对称,表面光滑。萎缩、脓肿(鸡白莉)。
卵巢:菜花样肿胀(马立克氏病),卵巢萎缩(沙门氏菌、新城疫、产蛋下降综合征等)。卵泡:充血、出血(禽霍乱),萎缩呈绿色(沙门氏菌)。
输卵管:右侧输卵管退化后呈水泡样。充满腐败渗出物、干酪物(沙门氏菌、大肠杆菌),系膜形成肿瘤(马立克氏病),水肿、形成水泡(产蛋下降综合征、传染性支气管炎)。 法氏囊:4月龄达最大后逐渐萎缩。出血、水肿、坏死、呈紫葡萄状或胶冻样(传染性法氏囊炎、新城疫、大肠杆菌等)。
鼻腔:在两鼻孔上方横断鼻腔,检查鼻甲骨,挤压鼻腔两侧,观察鼻腔分泌物及形状。流粘液、鼻甲骨肿大、变黑(传染性鼻炎),渗出物增多(禽流感等)。
口腔:剪开一侧口角,观察喉头、气管等。喉头出血,粘膜增厚(传染性喉气管炎),气管后段横纹出血、充血(传染性支气管炎),气管内有奶油样或干酪样渗出物(新城疫等)。
脚部关节:关节是否肿胀。脑部检查:脑膜是否充血、出血,小脑是否出血、软化。坐骨神经:为白色带状、有横纹、光滑、两侧对称。马立克氏病时有肿大变粗、横纹消失、呈灰白色或黄色。
1.4 桌面整洁(4分)
要求解剖过程在瓷盘内完成,所分离的器官、组织在瓷盘内摆放有序,所用器械洗净归位。
2 制备肝组织触片(20分)
制作肝组织触片的肝脏要在打开胸腹腔后及时完成采样,为了尽可能减少污染,采样时要点燃酒精灯,在火焰旁操作,可用无菌手术剪和镊子将肝脏表面病理变化较为明显的部分取下后放入无菌培养皿,备用。
2.1 无菌操作规范(10分)
将放有肝脏的无菌培养皿放置在酒精灯旁,点燃酒精灯,将载玻片于火焰上端轻微灼烧后备用,将手术剪和镊子于外焰灼烧后备用。
2.2 肝脏组织采样操作规范(5分)
用手术剪烫灼所选定的肝组织表面,再次将手术剪灼烧后适当降温,在经烫灼的区域剪下约1cm×1cm的肝组织,再用镊子夹住肝组织在载玻片上轻触一下,风干后备用。
2.3 触片的大小、厚度适宜(5分)
触片大小不宜超过1cm2,厚度不宜过厚(轻触后,肉眼可见载玻片表面有一层浑浊物,若可见很多颗粒性物质则过厚)。
3 染色(10分)
采用瑞氏染色法。
3.1 触片处理方法正确(2分)
为了使染色液不分散,先要用蜡笔在触片两端分别划一直线,后将载玻片放于染色缸上,备用。
3.2 染色流程正确规范(5分)
先滴加适量A液与涂片上,染色1分钟;再滴加2-3倍量的B液,用吸耳球充分混匀,染色3-5分钟;取出后蒸馏水冲洗(水流从触片区域上端留下,不可直接冲洗触片区域),用吸水纸轻放于触片表面吸干,备用。
3.3 触片制作效果(3分)
在镜检视野中,细菌、细胞核呈蓝色;嗜酸性颗粒呈粉红色或橘红色;淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质为紫蓝色或蓝色;完全成熟的红细胞呈粉红。
4 镜检(20分)
4.1 显微镜操作规范(10分)
打开显微镜后,将肝组织触片放于载物台;先将低倍物镜(4X)对准触片区域,上下调节粗准焦螺旋后找到视野;再将镜头调至高倍镜(40X),微调细准焦螺旋后确定视野;将物镜旋转开,滴一滴香柏油于触片上,再将物镜调至油镜,再次微调细准焦螺旋后确定视野。
4.2 视野清楚(10分)
视野中呈现的效果和肝组织触片制作、染色时间都有关,不可一概而论。参考:在油镜视野下,可见大量核呈紫红色,胞质淡蓝色的肝细胞;少量核呈紫色,胞质淡粉色的紅细胞;有的还可看到呈空泡状的脂肪细胞;如果有细菌,则呈蓝色。
5 病料处理方法规范及合理(8分)
病料应根据危害程度进行无害化处理。比赛中只需按要求摆放至指定地点,由主办方统一处理。
6 鸡病理剖检记录表(20分)
遵循原则为:看到什么就写什么。切忌以点概面,妄下结论。
6.1 外观及剖检病变识别准确(10分)
用简洁的语言,将上述外观检查结果和各组织、脏器的检查结果用文字表现出来。
6.2 报告填写规范,完整,综合结论正确(10分)
外观检查记录、剖检检查记录、显微镜检查结果、病理解剖学诊断与结论之间是前后呼应的,切忌自相矛盾。此外,记录表中只能填写抽签号,一旦出现参赛选手名字,则判为零分。
总的看来,本项技能大赛中,整个解剖过程和各个组织、脏器的识别、镜检操作的难度都不算大。而难点在于正确识别不同疾病的病变特征、病理变化,以及最终得出正确的结论,这就需要不断积累专业理论知识和生产实践经验。