【摘 要】
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目的 :观察微RNA-194(micro RNA-194,mi R-194)在结直肠癌细胞侵袭和迁移过程中的作用,并探讨其参与细胞上皮-间质转化的作用机制。方法 :将携带mi R-194基因的质粒载体转染
【机 构】
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重庆医科大学附属第二医院胃肠外科,重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心,浙江大学医学院附属第二医院肿瘤外科,
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目的 :观察微RNA-194(micro RNA-194,mi R-194)在结直肠癌细胞侵袭和迁移过程中的作用,并探讨其参与细胞上皮-间质转化的作用机制。方法 :将携带mi R-194基因的质粒载体转染结直肠癌SW480细胞,构建稳定高表达mi R-194的细胞系mi R-194-480,并观察该细胞的形态学变化。采用MTT法、细胞划痕愈合实验和Transwell迁移及侵袭实验分别观察mi R-194-480细胞的增殖、迁移和侵袭能力;同时,采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别检测mi R-194高表达对上皮-间质转化相关分子表达水平的影响。结果 :高表达mi R-194的结直肠癌mi R-194-480细胞系构建成功,细胞由之前的扁圆形转变为梭形,发生明显的间质性改变。mi R-194质粒转染后,mi R-194-480细胞的增殖能力并未见明显变化(P>0.05),但细胞迁移和侵袭能力却明显增强(P值均<0.001)。mi R-194高表达能够上调基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和波形蛋白(vimentin)的表达水平(P<0.05,P<0.001),而E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达明显下调(P<0.01)。结论 :mi R-194通过调节MMP-2、E-cadherin和vimentin的表达,参与结直肠癌细胞的上皮-间质转化,从而明显提高结直肠癌细胞的迁移和侵袭能力。
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