从噬菌体抗体库中淘洗血纤维蛋白特异的单链抗体

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：kassi

【摘要】

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为构建小鼠噬菌体抗本库，以获得对人血纤维蛋白特异的抗体，由小鼠脾脏提取ｍＲＮＡ，经反转录ＰＣＲ扩增出抗体重链、经链可变区基因片段，将二者和一段编码十五肽（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）３的ＤＮＡ接头借助重组ＰＣＲ组装成为单链抗体

【作者】

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孙雷高新胜

【机构】

：

北京大学生命科学学院

【出处】

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中国生物化学与分子生物学报

【发表日期】

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2000年6期

【关键词】

：

噬菌体抗体库血纤维蛋白特异抗体天然抗体 Phage antibody library Affinity selection Fibrinspecific a

【基金项目】

：

国家自然科学基金!资助项目 (396 70 170 ) ,,高校博士学科点专项科研基金!资助项目 (95 0 0 12 8)

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为构建小鼠噬菌体抗本库，以获得对人血纤维蛋白特异的抗体，由小鼠脾脏提取ｍＲＮＡ，经反转录ＰＣＲ扩增出抗体重链、经链可变区基因片段，将二者和一段编码十五肽（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）３的ＤＮＡ接头借助重组ＰＣＲ组装成为单链抗体（ｓｉｎｇｌｅ－ｃｈａｉｎａｎｔｉｂｏｄｙ，ＳｃＡｂ）基因。将单链抗体基因插入噬菌体展示载体ｐＣＡＮＴＡＢ－５Ｅ，通过电击法转化大肠杆菌ＴＧ１细胞，用辅助噬菌体Ｍ１３Ｋ０７超感染，构建

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