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以烟草品种K326旺长后期叶片为材料，用IEF／SDS—PAGE双向凝胶电泳技术对5种蛋白质提取方法（TCA／丙酮沉淀法、Mg／NP-40法、苯酚法、TCA-苯酚法和可溶性蛋白质提取法）进行比较，并对自制管胶pH范围进行探索。结果表明：苯酚法图谱中蛋白质条带最多、最清晰，并可获得较高纯蛋白质得率，为0．0420％，且图谱中蛋白质条带数最多、最清晰。自制管胶pH范围优化试验结果表明，以两性电解质pH3-10与pH5-8比例为1：3的2-DE图谱质量最佳，蛋白质可得到较好的分离。