磁珠固定化酶和LC-MS/MS筛选鉴定虎杖中的胰脂肪酶抑制剂

来源 :天然产物研究与开发 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zy124321628
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肥胖严重危害着人类的健康,各种减肥药物和替代疗法正在不断研发之中。本文首先结合单因素实验,利用响应面分析法,优化了羧基磁珠固定化胰脂肪酶合成条件,对其结构、稳定性、专一性及重复性进行了验证,然后通过该固定化酶筛选出了天然植物虎杖中的胰脂肪酶抑制剂,最后通过分子模拟对不同抑制类型抑制剂结合位置进行了预测。结果表明:缓冲液pH值7.48、PL浓度20.32 mg/mL、温度35.40℃为最佳合成条件,胰脂肪酶成功固定于羧基磁珠之上,且储存2周后酶活仍保持80%以上,可特异性筛选出阳性抑制剂,重复利用五次后酶活
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