【摘 要】
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目的 观察顺铂对视网膜母细胞瘤(RB)细胞B7-H1表达的影响,并探讨其作用机制.方法 分别采用浓度为0.375、0.750、1.500、3.000、6.000μg/ml顺铂处理人RB细胞HXO-Rb44细胞,作为不同浓度实验组;以RPMI 1640细胞培养液处理HXO-Rb14细胞作为空白对照组.采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测HXO-Rb44细胞B7
【机 构】
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430060,武汉大学人民医院眼科,430060,武汉大学人民医院眼科,430060,武汉大学人民医院眼科,430060,武汉大学人民医院中心实验室
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目的 观察顺铂对视网膜母细胞瘤(RB)细胞B7-H1表达的影响,并探讨其作用机制.方法 分别采用浓度为0.375、0.750、1.500、3.000、6.000μg/ml顺铂处理人RB细胞HXO-Rb44细胞,作为不同浓度实验组;以RPMI 1640细胞培养液处理HXO-Rb14细胞作为空白对照组.采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测HXO-Rb44细胞B7-H1 mRNA的表达;免疫荧光染色和流式细胞术检测HXO-Rb44细胞B7-H1蛋白表达.采用1.500μg/ml顺铂处理HXO-Rb44细胞0、15、30、60、120 min,蛋白免疫印迹(Western blot)检测细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)的磷酸化水平.结果 0.375、0.750、1.500、3.000、6.000 μg/ml组HXO-Rb44细胞B7-H1 mRNA表达均较空白对照组高,差异有统计学意义(F=395.478,P=0.000).0.375、0.750、1.500、3.000、6.000μg/ml组HXO-Rb44细胞B7-H1蛋白表达均较空白对照组高,差异有统计学意义(F=112.03,P=0.000).Western blot检测显示,1.500μg/ml顺铂激活HXO-Rb44细胞ERK1/2蛋白的磷酸化水平;随时间延长,其磷酸化水平逐渐增高,至30 min达高峰,以后又逐步下降.结论 顺铂能促进RB细胞B7-H1 mRNA和蛋白的表达;ERK1/2信号通路可能参与了这一过程。
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