【摘 要】
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目的利用CRISPR/Cas9基因编辑技术建立Nogo-B敲除的小鼠模型,为研究Nogo-B在肝纤维化中作用机制提供实验基础。方法根据Nogo-B基因第一外显子碱基序列,设计针对Nogo-B的sgRNA
【机 构】
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解放军总医院第二医学中心消化内科/国家老年疾病临床医学研究中心
【基金项目】
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国家自然科学基金(81570563).
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目的利用CRISPR/Cas9基因编辑技术建立Nogo-B敲除的小鼠模型,为研究Nogo-B在肝纤维化中作用机制提供实验基础。方法根据Nogo-B基因第一外显子碱基序列,设计针对Nogo-B的sgRNA,构建sgRNA表达质粒,将体外转录sgRNA和Cas9 mRNA对C57BL/6小鼠的受精卵进行显微注射。使用基因测序检测Nogo-B基因碱基的突变情况。取小鼠肝脏匀浆后提取总蛋白,通过WB检测Nogo-B在肝脏中的表达。结果获得了Nogo-B基因突变的F1代纯合子小鼠,Nogo-B基因缺失小鼠与野生型小
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