A型产气荚膜梭菌α毒素全基因的分子克隆与核苷酸序列分析

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应用PCR技术,从A型产气荚膜梭菌菌株NCTC64609中扩增出A型产气荚膜梭菌α毒素全基因(cpa1229基因)并将其克隆至pMD18-T载体中.经转化、IPTG/X-gal选择培养,提取质粒,PCR和EcoRI/PstI双酶切鉴定,筛选阳性重组克隆.经核苷酸序列分析证实,cpa1229基因阅读开放框架由1 194 bp组成.经GenBank检索对照分析,cpa1229基因序列与国外文献报道者同源性达983%,表明本实验所克隆的cpa1229基因即为A型产气荚膜梭菌α毒素基因.
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