口蹄疫病毒衣壳蛋白氨基酸突变对病毒热稳定性的影响

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口蹄疫是世界范围内广泛流行的一种偶蹄动物的烈性传染病,其病原为口蹄疫病毒(FMDV),它对热比较敏感,当温度高于30℃时,病毒衣壳容易解离为五聚体亚单位而影响疫苗的免疫保护效果.因此,改善病毒的热稳定性,制备热稳定优良的口蹄疫疫苗具有重大的应用价值.在实验室建立的口蹄疫病毒型内嵌和全长感染性克隆的基础上,在结构蛋白引入1个或2个氨基酸突变,分别构建了2种基因修饰的口蹄疫病毒全长重组质粒.全长质粒经NotⅠ线化后分别转染表达T7 RNA聚合酶的BSR/T7细胞以拯救重组病毒.间接免疫荧光和电镜分析表明,成功拯救到2株口蹄疫重组病毒.重组病毒经RT-PCR和序列测定证实只有1株重组病毒所含的耐热突变可以稳定遗传.热失活试验显示,拯救病毒与亲本病毒的耐热特性基本一致.结果表明在结构蛋白上引入V2090A-S2093F-H30568R的突变,并对口蹄疫病毒的热稳定性并没有明显的影响,为未来发展热稳定的口蹄疫疫苗提供了一定的参考.
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